“5’RACE克隆miRNA转录起始位点”参数说明
| 品牌： | 达鹊生物 |
“5’RACE克隆miRNA转录起始位点”详细介绍
5’RLM-RACE利用帽子位点的特征，特性地扩增完整Ⅱ型启动子转录的RNA，确保正真起始位点的获得。pri-miRNA是细胞核内一种瞬时表达的转录本，能够很快被Drosha降解，达鹊生物技术人员经过反复摸索找到提高RACE灵敏度的方法，有效提高了5’ RLM-RACE的成功率。
“去帽法”5’RACE原理如下图所示：
服务优势：
★ 应用“去帽法”原理，可以有效的扩增cDNA 5’末端全长序列；
★ 采用巢式PCR法，提高了5’ RACE的灵敏度和特异性，对低丰度的基因或极少量的RNA样品同样可以进行5′RACE实验；
★ 采用扩增性能优越的反转录酶，使长片段的RT-PCR扩增成为可能；
★ 一次反应可研究多个基因。
服务流程：
★ 根据特定基因，进行序列分析，决定研究方案；
★ 抽提总RNA；
★ 已知序列验证：依据设计引物扩增，验证参考序列的存在及方向；
★ 5’RACE操作；
★ 对获取的序列进行测序验证（克隆到载体或PCR产物直接测序）；
★ 分析结果，向客户提供完整的实验操作规程、实验报告、测序结果以及测序彩色峰图、引物、质粒以及含有该质粒的菌种等。
客户提供：
新鲜的组织或细胞材料，背景材料：RNA 来源、纯度、丰度、所扩增基因的估计长度、种属情况、是否具有同源序列等，已知部分的cDNA序列及方向。
我们提供：
插入待检5’端的质粒载体，测序报告以及实验报告。
质量保证：
正确的5’端转录起始位点位置。
图2：miRNAs 5’RLM-RACE克隆成功率
图3：三种miRNAs转录本5’与3’端的克隆
